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水中粪大肠菌群的常见检测方法

1、聚合酶链式技术

提取粪大肠菌群混悬液和待测水样的DNA，利用PCR技术扩增编码约260bp的LacZ***（β-半乳糖苷酶***）和约150BP的UdiA***（β-D-半乳糖苷酶***）的DNA，分别检测大肠菌群数和大肠***。

2、荧光原位杂交技术

由于粪大肠菌群特异的DNA序列，借助荧光标记的特异寡聚核苷酸片段作为的探针与待测水样中的DNA分子杂交，将杂交细胞经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量分析，确定菌群数。

目前，大肠菌群检测方法发展很快，已提高到分子生物学水平，使检测更快速、准确。酶底物法以其操作简便、检测周期短，将取代多管发酵法、滤膜法等传统方法，尤其是酶底物法采用密封培养技术，在检测***污水时可以减少人员接触而降低检测人员的致病风险，因此具有更强的实用价值和应用价值，正是目前水中粪大肠菌群的快速检测标准方法之一。

程控定量封口机主要用于水样中的绿脓假单胞菌群、肠球菌、总大肠菌群和粪大肠***、大肠埃希菌、菌落总数的快速检测、可野外携带、应急、定量检测。

符合《GB5749－2006生活饮用水标准》

符合《GB/T5750.12－2006生活饮用水标准检验方法》

符合《CJ/T206—2005城市供水水质标准 》

符合《GB3838-2002,地表水环境质量标准》

符合《GB/T 14848-93地下水质量标准》

符合《GB 9667-1996,游泳场所卫生标准》

符合《WHO， EPA，wastewater Rule 40 CFR Part 136.3》

符合《DB21/T2368-2014海水中总大肠菌群和粪大肠菌群快速测定 酶底物法》

酶底物法检测系统由程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物法检测***四部分组成，检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水等。

定量封口机厂家介绍酶底物法检测使用方法。

配件以及技术方案：

针对酶底物法检测的原理采购相应的设备。用途如下：

程控定量封口机：用于定量检测盘的封口。

酶底物检测***：用于选择性检测水中的目标***。

51或97定量检测盘：用于判断目标微生物数量。

100毫升定量瓶/取样瓶：***的为水样与***提供溶解环境。

紫外手持式紫外分析仪带暗室：测定大肠埃希氏菌时用于在暗室中观察荧光。

操作方法：

一步：将水样加入100ml取样瓶中，加入酶底物法检测***，拧紧盖子摇匀至完全溶解。

第二步：将样品加到定量检测盘中。

第三步：使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口。

第四步：粪大肠菌群的测定则将培养箱设定为44.5℃，培养24h。

第五步：对照比色盘数阳性（显***，或荧光）格子数，按照使用的检测盘类型，分别查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大肠菌群的菌群数。对照MPN表出数据。

第六步：根据稀释倍数结果按公式计算结果。

大肠菌群（个/L）=MPN值×稀释倍数×1000mL/100mL。